siRNA合成
小干扰RNA(siRNA)是RNA干扰技术的核心工具,通过RISC复合体引导Argonaute切割靶mRNA,在转录后水平实现精准基因沉默。
提供常规合成、化学/荧光修饰及三条候选序列套餐,可按需选配MS检测,序列正确无误,结果以批次报告为准。
  • 3-6个工作日

    常规交付周期

  • ≥ 90%

    HPLC纯度

  • MS可选

    结果以批次报告为准

  • ≥ 70%

    三条候选序列套餐

siRNA合成
siRNA三保一套餐

siRNA合成

转录后水平的精准沉默

小干扰RNA(siRNA,small interfering RNA)通常为21-23 nt双链RNA。进入细胞后装载至RISC,反义链与靶mRNA互补配对,引导Argonaute切割降解靶mRNA,实现转录后水平的精准沉默。

siRNA作用快(24-72h)、操作简便、适合高通量筛选,是短期基因敲低的有力工具。siRNA可按需选配MS检测,OPC/HPLC纯化,序列正确无误,结果以批次报告为准。

  • 常规siRNA:标准化学合成双链RNA
  • 化学修饰:2'-OMe/2'-F/硫代/LNA等
  • 荧光标记:FAM/Cy3/Cy5/Cy5.5/biotin

siRNA三保一套餐

候选序列套餐,提供售后支持

针对靶基因提供三条独立siRNA序列,并配套完整对照体系,在约定条件下进行相应检测或验证,序列正确无误。

  • OPC/HPLC纯化,可按需选配MS检测,序列正确无误,结果以批次报告为准
  • 未达到约定指标,经评估后免费重合成三条新siRNA
  • 配套阴性对照、Cy3标记阴性对照和阳性对照

siRNA vs shRNA vs ASO:如何选择?

根据起效速度、持续时间与实验场景选择基因沉默工具
对比维度 siRNA(本服务) shRNA ASO
分子类型 21-23nt双链RNA DNA载体表达发夹RNA 15-25nt单链DNA/RNA嵌合体
作用机制 RISC→mRNA切割 Dicer加工→RISC降解 RNase H切割杂交链
起效速度 24-72h 48-96h 24-72h
作用持久 瞬时(3-7天) 持久(可稳定表达) 瞬时(3-7天)
转染方式 直接转染RNA DNA质粒或病毒 直接转染单链
适用场景 短期敲低、高通量筛选 长期敲低、稳定株构建 lncRNA/circRNA敲低、剪接调控
脱靶风险 seed脱靶(中等) seed脱靶(中等) 序列依赖脱靶(较低)

选择建议:短期可逆敲低或高通量筛选选siRNA;长期稳定敲低选shRNA;lncRNA/circRNA敲低或剪接调控选ASO。

服务优势

快速交付、灵活纯化、完整对照与候选序列套餐
  • 先进合成平台 · 质谱验证(可选)
    可按需选配MS检测,序列正确无误,结果以批次报告为准;HPLC纯度≥90%,批次稳定。
  • 快速交付 · 3-6个工作日
    常规siRNA和三保一套餐快速交付,并提供紧急订单加急通道。
  • 灵活规格 · 多档纯化
    5nmol/2OD起至mg级,支持OPC普通纯化和HPLC高纯度。
  • 完整对照体系
    三保一套餐含阴性、阳性及Cy3标记转染对照;另支持FAM/Cy3/Cy5/Cy5.5/biotin标记。
  • 候选序列筛选 · 三条序列套餐
    在约定条件下进行相应检测或验证,序列正确无误;未达到约定指标时按约定重新设计合成。
  • 一站式上下游服务
    衔接靶序列设计、基因合成、化学修饰siRNA及miRNA mimics/inhibitor服务。

服务详情

支持定制合成、修饰标记与三保一效率套餐
定制siRNA合成:客户提供siRNA序列,按需求化学合成目标双链;序列正确无误,结果以批次报告为准;干扰效果需结合实验条件评估。
服务项目 规格 纯化方式 交付周期 说明
常规siRNA合成
5nmol起 OPC/HPLC 6个工作日 21-23nt双链RNA
荧光修饰siRNA
5nmol起 OPC/HPLC 6个工作日 FAM/Cy3/Cy5/Cy5.5/biotin
化学修饰siRNA
5nmol起 OPC/HPLC 6个工作日 2'-OMe/2'-F/硫代/LNA等
siRNA三保一套餐:针对不同区域设计三对siRNA,标准条件下至少一对实现有效沉默。
套餐内容 规格 纯化方式
目的基因siRNA(3靶点)
5nmol(2OD)/靶点 OPC
阴性对照siRNA
2.5nmol(1OD) OPC
Cy3标记阴性对照
2.5nmol(1OD) OPC
阳性对照siRNA
2.5nmol(1OD) OPC

效果指标:在约定条件下进行相应检测或验证,序列正确无误。未达到约定指标时,用户可提供三条及阳性对照定量数据,经评估后按约定重新设计。

服务流程

需求提交、方案确认、合成质检与交付售后
  • 提交需求
    提供靶基因信息或序列、规格、纯化方式及修饰需求;套餐另需物种及ID号。
  • 确认方案
    1个工作日内出具方案、周期及报价。
  • 签约合成
    完成化学合成、纯化、MS验证(可选)及QC检测,出具质检报告。
  • 交付售后
    冻干粉发货并附报告,提供转染咨询;候选序列套餐未达到约定指标时按约定重新设计合成。

交付标准

冻干粉与完整合成及使用资料交付
  • siRNA冻干粉
    1OD分装,-20°C避光保存,复溶即可使用。
  • RNA合成报告
    含序列、分子量、纯化方式、OD值/浓度等信息。
  • 质谱检测报告(可选)
    MS图谱验证(可选)合成序列分子量正确。
  • 纯度检测报告
    HPLC规格提供色谱图,纯度≥90%。
  • 使用说明书
    复溶方法、保存建议和转染参考条件。

质量控制标准

序列、纯度、双链配对、外观与可选内毒素检测
QC项目 检测方法 合格标准
序列正确性 质谱(MS)(可选)分子量测定 偏差≤0.1%
纯度 HPLC/OPC OPC≥75%;HPLC≥90%
双链配对 非变性PAGE/CGE 双链比例≥85%
外观 目视检查 白色或类白色冻干粉
内毒素 LAL法(可选) <0.5 EU/mg

应用场景

覆盖基因功能、通路解析、靶点验证、筛选与rescue实验

基因功能研究

siRNA作用快、操作简便,三条候选序列套餐适合未验证靶点初筛。

信号通路研究

敲低关键节点并结合Western Blot或报告基因分析,解析调控网络及基因互作。

药物靶点验证

模拟药物抑制效果,评估候选靶点可成药性和潜在副作用,并用荧光siRNA监控转染。

高通量筛选

适配96/384孔板中低通量筛选,支持3-4条/基因设计、批量合成及标准化QC。

RNAi Rescue实验

敲低后以抗性ORF载体回补蛋白,验证表型特异性并实现可逆时序控制。

常见问题

关于siRNA选择、设计、纯化、转染和对照的常见问题
siRNA和shRNA有什么区别?我该选哪个?

siRNA是化学合成的21-23nt双链RNA,直接转染细胞起效,作用快(24-72h)但瞬时(3-7天),适合短期实验和高通量筛选;shRNA是DNA载体表达的发夹RNA,经细胞内Dicer加工成siRNA起效,作用慢(48-96h)但可通过质粒稳定表达或病毒整合实现长期沉默,适合构建稳定敲低株。


短期可逆敲低选siRNA,长期稳定敲低选shRNA。

siRNA三条候选序列套餐是什么?效果如何评估?
针对一个靶基因设计3条独立siRNA,并配套阴性、Cy3标记阴性及阳性对照。在约定条件下进行相应检测或验证,序列正确无误;实验效果需结合靶位点可及性、mRNA二级结构及转染条件等因素评估。未达到约定指标时,可提供三条及阳性对照定量数据,由技术人员评估后按约定重新设计。
siRNA怎么设计?你们能帮我设计吗?

siRNA设计遵循多项原则:
(1)靶序列长度21-23nt,GC含量30-50%最佳;
(2)避开mRNA二级结构紧密区域,确保靶位点可及性;
(3)正义链3'端热力学稳定性低于反义链5'端(AUM原则),确保反义链优先装载RISC;
(4)避开SNP高频位点、重复序列;
(5)全基因组脱靶分析,排除seed序列(2-8位)与非靶标mRNA 3'UTR高度同源的候选。


三保一套餐由我们设计,采用经典设计逻辑+脱靶分析,确保3条中至少1条有效。

OPC和HPLC纯化有什么区别?

OPC(Oligonucleotide Purification Cartridge)是 cartridge纯化,去除短链失败产物和盐分,纯度约75%,成本较低,适合常规细胞转染实验;


HPLC(高效液相色谱)纯化纯度≥90%,去除失败产物更彻底,适合对纯度要求高的实验(如体内实验、敏感细胞转染、定量实验)。


常规细胞系(HEK293/HeLa)转染选OPC即可;原代细胞、干细胞、动物实验或需发表文献的数据建议选HPLC

siRNA转染后多久见效?持续多久?

siRNA转染后,RISC装载和mRNA降解在24-48小时内发生,mRNA水平敲低在48-72小时达峰;蛋白水平由于现有蛋白需降解,通常72-96小时达峰。敲低效果持续3-7天(因细胞分裂稀释siRNA),之后逐渐恢复。


如果需要更长时间敲低,可选择shRNA(稳定表达)或重复转染siRNA(每3-4天补加)。

siRNA转染效率低怎么办?

siRNA转染效率直接影响敲低效果,建议:
(1)使用Cy3/FAM荧光标记siRNA(或套餐中的Cy3标记阴性对照)监控转染效率,目标>80%;
(2)优化转染试剂(可适用质因生物ZY FectEasy RNA转染试剂)和比例;
(3)细胞状态需良好(对数生长期、低代次、无支原体污染);
(4)siRNA工作浓度通常10-50nM,过高增加脱靶风险;
(5)敏感细胞(原代、干细胞)可考虑电转染或病毒递送。


三保一套餐含Cy3标记对照,方便监控转染效率。

siRNA会脱靶吗?怎么减少?
主要包括seed序列介导脱靶和免疫激活脱靶。可通过全基因组分析、seed区2'-OMe修饰、降低浓度至10-20nM及多条独立siRNA验证来降低风险。
阳性对照和阴性对照有什么作用?

阴性对照(Negative Control, NC):与靶基因无关的siRNA序列,不靶向任何基因。作用是验证敲低表型的特异性——如果NC也有表型变化,说明是非特异效应(脱靶或转染毒性)。Cy3标记NC额外可监控转染效率。


阳性对照(Positive Control, PC):靶向管家基因(如GAPDH/ACTB)的siRNA,已知有效。作用是验证整个实验体系(转染试剂、细胞状态、检测方法)是否正常——如果PC都敲低失败,说明实验体系有问题,需排查转染条件而非靶序列。

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